一、采集前准备
实验前大鼠禁食不禁水 8–12 h，减少血脂、食物残渣对血清质量的干扰。
准备采血管、离心管、采血针、酒精棉、镊子、止血工具，所有耗材无菌无热源。
根据实验需求选择采血方式：眼眶静脉丛采血、腹主动脉采血、心脏采血。
二、常用采血操作规范
1. 眼眶静脉丛采血(活体多次采血)
左手固定大鼠，轻压颈部使眼球充血凸起。
右手持肝素化毛细管或采血针，从内眼角刺入静脉丛，缓慢取血。
采血后用干棉球轻压眼球止血，避免淤血、溶血。
2. 腹主动脉 / 心脏采血(终末大量采血)
大鼠麻醉后仰卧固定，打开腹腔 / 胸腔，暴露血管。
注射器垂直刺入血管，缓慢匀速抽取血液，避免产生气泡。
采血完成后快速处死大鼠，减少应激对血清指标影响。
三、血清分离关键步骤
血液室温静置 30–60 min 自然凝固，不可剧烈震荡，防止溶血。
离心机参数：3000–3500 r/min，离心 10–15 min。
小心吸取上层淡黄色上清即为大鼠血清，避免吸到血细胞。
四、溶血与污染预防
采血动作轻柔，避免暴力穿刺、快速抽拉造成红细胞破裂溶血。
全程无菌操作，防止毛发、组织碎屑、细菌污染样本。
避免血液接触组织液，保证血清纯度。
五、采集后保存要求
新鲜血清短期 4℃保存，长期分装后置于‑20℃或‑80℃冻存。
避免反复冻融，影响蛋白、细胞因子、生化指标稳定性。
做好样本标记，记录采血时间、大鼠编号、组别信息。
六、实验注意事项
操作过程减少大鼠应激，应激会导致激素、炎症因子异常。
采血速度统一，保证组间样本一致性。
废弃血液、耗材按生物安全规范处理。
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