Tritosomes-纯度更高的溶酶体新选择，为临床前药物研发效率赋能！

Keywords：溶酶体，纯化溶酶体组分，Tritosomes，SD大鼠肝tritosomes，Lysosomes，Tyloxapol（Triton WR 1339）临床前药物研发，ADC药物，小核酸药物，siRNA，ASO，Preclinical Drug Development;

随着生物技术的快速发展，溶酶体（Lysosomes）在药物研发中的重要作用日益凸显，尤其是小核苷酸药物及ADC药物，溶酶体是该类药物开发过程中必-不可-少的体外研究模型。因此，开发分离溶酶体的技术势在必得。然而，溶酶体具有与线粒体非常相似的密度，传统密度梯度离心法难以有效分离。Tyloxapol（Triton WR 1339）药物的应用通过选择性降低溶酶体密度解决了这一难题，通过该种方法分离得到的溶酶体称为Tritosomes。Tritosomes是一种特殊的纯化和富集溶酶体组分，为溶酶体相关研究提供了更精准的实验手段，尤其在药物研发领域具有广泛应用价值。鉴于此，IPHASE作为体外研究生物试剂引-领者，成功研发SD大鼠肝Tritosomes，为客户开展药物研发等试验提供更多选择。

01    Tritosomes介绍

Tritosomes是一种通过负载非离子型表面活性剂Tyloxapol（Triton WR-1339）制备的特殊溶酶体。通过向实验动物（如大鼠）注射Tyloxapol（Triton WR-1339），该物质会被肝细胞内吞并聚集在溶酶体中。通过疏水作用嵌入溶酶体膜，与膜磷脂形成复合物，导致溶酶体脂质组成改变。例如，处理后的溶酶体甘油三酯和胆固醇含量显著增加，而膜脂流动性提高。这种脂质重构直接降低了溶酶体的整体密度，使其从常规的1.18-1.21 g/mL降至1.08-1.13 g/mL，与线粒体（1.18-1.20 g/mL）的密度差异扩大至可区分范围。此外，Tyloxapol（Triton WR-1339）可能干扰溶酶体与其他细胞器（如吞噬体）的融合过程。例如，在吞噬实验中，结合Triton的溶酶体无法与含牛血清白蛋白的吞噬体融合，导致两者在密度梯度中分离。这种 “隔离效应" 进一步确保溶酶体在密度梯度离心时形成独立条带。因此，结合了Tyloxapol的溶酶体被人们称为Tritosomes，之后渐渐演变为了研究纯化和富集溶酶体时的常用技术。

Tritosomes保留了溶酶体的酸性水解酶活性（如组织蛋白酶、酸性磷酸酶），并且与传统溶酶体分离方法相比，该纯化体系得到的Tritosomes具有更高的纯度（可去除90%以上的线粒体污染）和均一性，为研究人员提供了精准的亚细胞系统，可排除其他细胞器的干扰，专门聚焦于影响药物行为的溶酶体相关过程。

02    Tritosomes在临床前药物研发中的应用

Tritosomes的核心应用价值在于为科研人员深入解析药物与溶酶体的相互作用机制提供关键支持。临床前研究中，研究人员借助该制剂探究实验性化合物在溶酶体内的截留程度，这一过程会直接影响药物的组织分布特征与长期蓄积水平，是评估药物体内行为的重要环节。此外，明确药物被溶酶体摄取的具体机制，对于预测药物相关不良反应（如药物诱导的磷脂沉积症）同样至关重要：此类不良反应不仅会削弱药物的临床安全性，还可能导致其无法通过监管机构的上市审批，直接影响药物研发进程。

【Tritosomes与抗体偶联药物（ADC）研发】

抗体偶联药物（Antibody-Drug Conjugate，ADC）是通过连接子（Linker）将小分子细胞毒素（Paylaod）偶联至靶向性抗体或抗体片段上的一类新型的生物技术药物（图1），可以增强药物靶向性和稳定性、减少临床毒副反应、提高治疗指数，兼具传统小分子药物的杀伤效应和抗体药物的靶向性，主要应用于抗肿瘤或者其他疾病的靶向治疗。

图1 ADC药物的结构和功能示意图

来源：Antibody drug conjugate: the“biological missile" for targeted cancer therapy

在ADC药物的研发过程中，Tritosomes作为替代研究模型，在探究细胞毒性药物胞内释放机制中发挥关键作用。由于ADC需依赖溶酶体蛋白酶与水解酶完成两大核心过程：切割连接子（linker）或降解抗体骨架，因此经纯化并富含溶酶体酶的Tritosomes可提供一个可靠且高效的体外研究平台，为评估上述过程的效率及作用机制提供支持。

通过模拟体内溶酶体降解微环境，Tritosomes能够帮助研究人员厘清三项核心信息：不同连接子化学结构的切割效率高低、载荷的释放模式，以及物种特异性差异对药物释放过程的潜在影响。这一特性使tritosomes成为ADC研发中重要的模型：在推进至体内实验前，借助该模型评估ADC的稳定性及代谢特性，不仅可显著降低实验成本，还能为临床前实验动物的筛选提供科学依据。

【Tritosomes与小核酸药物研发】

小核酸药物，又称寡核苷酸药物（Oligonucleotides, ONs），凭借其独特的技术特点成为近年来新药研发领域关注的焦点，是目前发展最-为迅猛的基因疗法之一。小核酸药物包括小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）、反义寡核苷酸（Antisense oligonucleotide，ASO）、微小RNA（microRNA, miRNA）、小激活RNA（small activating RNA, saRNA）、信使RNA（messenger RNA, mRNA）、核酸适配体（Aptamer）和抗体核酸偶联药物（Antibody-oligonucleotide conjugates, AOC）等。当前研究的重点主要集中于siRNA、ASO和Aptamer这三种小核酸药物上。小核酸药物研究的核心挑战在于：多数寡核苷酸会被内体与溶酶体捕获截留，一旦无法从这类细胞器中逃逸进入细胞质，便会在其中快速降解，导致治疗活性丧失。

在小核酸药物研究领域，tritosomes的价值同样突出。Tritosomes能够提供一个可控的体外研究体系，专门用于探究未修饰及化学修饰小核酸药物的降解动力学规律。通过在该体系中对小核酸药物开展测试，研究人员不仅能评估各类化学修饰抵御溶酶体核酸酶降解的能力强弱，还能验证旨在促进内体逃逸的递送系统的实际效用。因此，tritosomes可作为 “生化应激测试" 工具，在推进至复杂动物模型实验阶段前，为小核酸药物的稳定性优化及递送策略改进提供关键支持。

03    IPHASE相关产品

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综上所述，采用Tyloxapol（Triton WR-1339）制备的tritosomes是一种纯化和富集溶酶体组分，其研究是现代临床前药物研发体系中核心组成部分。借助肝tritosomes，科研人员能够更精准地开展三项关键研究工作：探究药物的胞内分布特征、评估药物在溶酶体内的稳定性，以及分析药物潜在的安全性风险。而随着制药行业愈发清晰地认识到溶酶体通路对药物疗效与毒性的双重重要性：二者直接决定药物研发成败，肝tritosomes也愈发彰显其不可替代的工具属性：其可有效衔接实验研究与疗法的成功研发，成为推动药物从实验室研究迈向临床应用的关键桥梁。鉴于此，IPHASE作为体外研究生物试剂引-领者，凭借先-进的设备、专业的技术人员和多年研发经验，成功研发SD大鼠肝Tritosomes和ICR/CD-1小鼠肝Tritosomes，为客户开展药物研发等试验提供更多选择。