Keywords:NK细胞分离;NK细胞分选;磁珠分选NK细胞;NK细胞冻存液;NK细胞培养基;NK细胞扩增培养基;NK细胞扩增试剂盒;自然杀伤细胞;细胞治疗;NK细胞治疗;Isolation of NK Cells;NK Cell Sorting;Magnetic Bead-Based NK Cell Isolation;NK Cell Cryopreservation Medium;NK Cell Culture Medium;NK Cell Expansion Medium;NK Cell Expansion Kit;Natural Killer cells;NK Cells; Cell Therapy;NK Cell Therapy; CAR-NK;
在肿瘤免疫治疗、抗病毒-药物开发、自身免疫疾病研究等领域,自然杀伤细胞(Natural Killer Cells, NK cells)正逐渐从幕后走向台前。作为先天免疫系统的核心成员,NK细胞凭借其独特的"快速杀伤"能力和"无需预敏"的特性,成为药物研发中不-可或-缺的关键角色。因此,高纯度NK细胞至关重要,IPHASE人NK细胞阴选试剂盒应运而生。
01 NK细胞的生理特性
自然杀伤细胞(Natural Killer cells,NK cells)不仅是免疫系统的"第一道防线",更是药物研发的关键突破口。
NK细胞具有独特的免疫识别机制,不同于T细胞依赖的MHC呈递抗原,NK细胞通过“丢失自我"和“诱导自我"机制识别靶细胞,使其在肿瘤异质性环境中具有广谱杀伤优势;此外,自然杀伤细胞(Natural Killer cells,NK cells)精准调控激活性受体(NKG2D、NCRs、CD16)和抑制性受体(KIRs、NKG2A)的动态平衡,为药物开发提供多个可干预靶点。NK细胞的功能也多种多样。已有研究表明,NK细胞通过穿孔素/颗粒酶途径和死亡受体途径(FasL/Fas、TRAIL/DR4/5)诱导靶细胞凋亡,产生直接细胞毒作用;其分泌IFN-γ、TNF-α、GM-CSF等细胞因子来调节免疫微环境,并具有适应性免疫特征,为长效疫苗开发提供新思路。
正因为NK细胞的独特生理特性,其在抗体药物(Antibody Drugs)开发、细胞治疗(Cell therapy)领域及小分子药物筛选等三面具有不可替代的优势。
【抗体药物(Antibody Drugs)开发】
·抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(Antibody-Dependent Cell mediated Cytotoxicity,ADCC)效应优化平台
① CD16A(FcγRIIIa)多态性(158V/F)对单抗疗效的影响评估
② Fc段工程化改造(如糖基化修饰、氨基酸突变)的体外验证系统
③双特异性抗体(如CD16×CD30、CD16×BCMA)的效价测定
·检查点抑制剂研究
①NK细胞特异性检查点(NKG2A/HLA-E、KIR/HLA-C)抑制剂开发
②PD-1/PD-L1抗体对NK细胞功能的交叉影响评估
【细胞治疗领域】
·CAR-NK技术突破
①第二代CAR设计(整合IL-15表达、自-杀基因开关)
②异体通用型解决方案(CRISPR敲除HLA-I/CD38避免排斥)
③冷冻保存技术对细胞活性的影响研究
·体外扩增工艺开发
①不同细胞因子组合(IL-2/IL-15/IL-21)的增殖效率比较
②饲养细胞(如K562-mbIL21)与无饲养体系的效果评估
③代谢调控(如谷氨酰胺依赖性)研究
【 小分子药物筛选】
·NK细胞激活剂开发
①小分子TLR激动剂(如TLR8激动剂VTX-2337)
②表观遗传调节剂(HDAC抑制剂增强NKG2D配体表达)
·免疫代谢调控
①mTOR抑制剂对NK细胞记忆形成的影响
②缺氧条件下NK细胞功能维持策略
简而言之,NK细胞已从单纯的效应细胞发展为药物研发的"多功能平台",其应用贯穿靶点发现、药物筛选、临床前评价到治疗方案优化全流程。因此,合适的NK细胞分选技术在NK细胞应用上显得至关重要!
02 IPHASE NK细胞阴选试剂盒解锁免疫治疗药物研发的关键钥匙
随着NK细胞在免疫治疗中的地位日益凸显,尤其是在通用型细胞治疗(Cell Therapy)领域的巨大潜力,对高质量、标准化NK细胞来源的需求将持续激增。然而,通过密度梯度离心法或阳性分选法等传统分选法获得的NK细胞,其结果却不尽人意。
纯度低:通过密度梯度离心等方法获得的PBMC中,NK细胞占比仅5%-15%,杂质细胞干扰严重。
耗时费力:多步骤操作流程冗长,极大消耗研究人员的时间与精力。
批次差异不稳定:手工操作难以保证分离结果的一致性,影响实验可重复性。
可能活化:某些阳性分选方法可能激活NK细胞,改变其天然状态。
这些痛点直接制约着药物研发中对NK细胞功能、药效及安全性评价的准确性。因此,合适的NK细胞分离(Isolation of NK Cells)或NK细胞分选(NK Cell Sorting)技术显得至关重要!鉴于此IPHASE作为体外研究生物试剂引-领者,研发了人NK细胞阴选试剂盒,该试剂盒基于磁珠分选法(Magnetic Activated Cell Sorting, MACS)的原理,采用“排除法"策略,特异性去除PBMC中不需要的细胞类型(如T细胞、B细胞、单核细胞、树突细胞、血小板等),从而富集高纯度的未活化的磁珠分选NK细胞(Magnetic Bead-Based NK Cell Isolation),是目前效率-最-高的分选方法。
阴性分选(Negative Selection)其革命性意义体现在高纯度、非活化、高效性和稳定性等四个方面!
高纯度:阴性分选(Negative Selection)得到的NK细胞轻松实现>90%纯度,极大降低杂质干扰。
天然状态:阴性分选不依赖NK细胞表面标志物,避免抗体结合导致的非预期活化,保留细胞原始状态。
高效便捷:简化操作流程(通常1-2小时内完成),显著提升实验效率。
稳定可靠:试剂盒标准化生产,保证不同实验间、不同批次间结果的高度一致性。
IPHASE人NK细胞阴选试剂盒,以1×10^7个细胞为一个test,分别有10test和100test两个规格,可供客户从外周血单个核细胞中进行NK细胞的分选,并对其进行严格的质量把控,包括细胞活率和细胞纯度两方面。下图为IPHASE技术人员使用流式细胞仪记录使用人NK细胞阴选试剂盒分选出的人NK细胞的纯度变化,可以观察到在分选前NK细胞在PBMC中的占比为10.6%,分选后NK细胞的纯度提高到90.4%,其活率为92.5%,满足客户研究需求,说明IPHASE 人NK细胞阴选试剂盒是免疫治疗药物开发不-可或-缺的“好伴侣"!
IPHASE还已生产出相应的NK细胞培养基(NK Cell Culture Medium)、NK细胞冻存液(NK Cell Cryopreservation Medium)、NK细胞扩增培养基(NK Cell Expansion Medium)和NK细胞扩增试剂盒(NK Cell Expansion Kit),助力于客户的NK细胞治疗(NK Cell Therapy),如CAR-NK。且除了NK细胞阴选试剂盒外,小鼠NK细胞阴选试剂盒,同时针对猴、大鼠、犬等种属均在陆续开发中,请各位客户敬请期待......此外,IPHASE各种属阳选试剂盒、适配体阳选及无痕分选试剂盒均已开发成功,具体产品及规格如下表所示:
种属 | 名称 | 规格 |
人 | 人CD3+T细胞阴选试剂盒 | 10/100 test |
人CD3+T细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人外周血单个核细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 | |
人CD4+T细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人CD8+T细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人CD8+T细胞适配体阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人CD8+T细胞无痕分选试剂盒 | 10/100 test | |
人CD14+ 单核细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人单核细胞阴选试剂盒 | 10 test | |
人CD14+单核细胞适配体阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人CD19+B细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人Pan B细胞阴选试剂盒 | 10 test | |
人CD56+ 细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
人NK细胞阴选试剂盒 | 10/100 test | |
人红细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 | |
人脾脏单个核细胞分离试剂盒 | 1套 | |
猴 | 猴外周血单个核细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 |
猴红细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 | |
猴脾脏单个核细胞分离试剂盒 | 1套 | |
犬 | 比格犬外周血单个核细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 |
比格犬脾脏单个核细胞分离试剂盒 | 1套 | |
大鼠 | 大鼠外周血单个核细胞分离试剂盒 | 分离50/100mL全血 |
大鼠红细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 | |
大鼠脾脏单个核细胞分离试剂盒 | 1套 | |
小鼠 | 小鼠外周血单个核细胞分离试剂盒 | 分离50/100mL全血 |
小鼠红细胞分离试剂盒 | 分离100mL全血 | |
小鼠CD3+T细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
小鼠CD4+T细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
小鼠CD8+T细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
小鼠CD19+B细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
小鼠Pan B细胞阴选试剂盒 | 10 test | |
小鼠NK细胞阴选试剂盒 | 10 test | |
小鼠CD14+ 单核细胞阳选试剂盒 | 10/100 test | |
小鼠单核细胞阴选试剂盒 | 10 test | |
小鼠脾脏单个核细胞分离试剂盒 | 1套 | |
辅助产品 | 链霉亲和素磁珠300nm | 1/5 mL (10mg/mL) |
细胞分选磁力架 | 5mL*单孔 | |
细胞分选磁力架 | 5mL*6孔;15mL*6孔 | |
人k562滋养细胞 | 1million | |
人NK细胞扩增基础培养基 | 500mL | |
人NK细胞扩增生长因子 | 10mL |
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