破解CDE“人皮令”的关键在这里！

关键词：皮肤组织；离体人皮肤；猪皮肤；体外透皮试验；皮肤屏障完整性试验；全身经皮给药系统；Skin tissues；Ex Vivo Human Skin；Pig Skin; In Vitro Skin Permeation Test,IVPT；Skin Barrier Integrity Test；Transdermal Drug Delivery Systems,TDDS；

2025年6月，中国国家药品监督管理局药品审评中心（Center for Drug Evaluation, CDE）公布了《局部起效化学仿制药体外释放（IVRT）与体外透皮（IVPT）研究技术指导原则（试行）》的通告。其中，体外透皮试验（IVPT）关于皮肤（Skin tissues）模型选择较征求意见稿有了重大变革！由首-选猪皮肤（Pig Skin）变为了只认离体人皮肤（Ex Vivo Human Skin），即“人皮令"的名称由来。

图片来源：参考文献[1]

那么，何为体外透皮试验，又为何要首-选离体人皮肤（Ex Vivo Human Skin）为试验模型呢？

01    何为体外透皮试验（In Vitro Skin Permeation Test,IVPT）

体外透皮试验（In Vitro Permeation Testing, IVPT）是评估全身经皮给药系统（Transdermal Drug Delivery Systems,TDDS）制剂有效性的方法之一，另一种即为体内法。与传统体内给药模式相比，全身经皮给药系统（Transdermal Drug Delivery Systems,TDDS）在避免肝首过效应、非侵入性给药方式及长期维持稳定的血药浓度等方面具有显著优势；同时，已有较多试验数据表明体外透皮试验与常规体内试验具有同样重要的参考价值[2]。因此，体外透皮试验（In Vitro Permeation Testing, IVPT）是皮肤制剂药物不-可或-缺的研究方法之一！

体外透皮试验（IVPT）研究可用于评估局部用药中活性成分在皮肤作用部位或附近的释放速率与程度，并可用于表征和比较受试局部制剂与参比制剂中药物生物利用度的速率与范围[3]。IVPT可以精确测量化合物在各个皮肤层的分布、渗透量和渗透速率，便于探索早期药物吸收阶段的皮肤渗透性差异。该方法避免了动物活体的引入，符合3R原则；也可用于评估外用药品的生物等效性（Bioequivalence, BE）；此外，若结合体外释放试验（In Vitro Release Testing, IVRT)数据，可以为皮肤局部外用药物处方等同性评价中的微观结构特性（Q3）的等同性评价提供重要的证据[4]。

图片来源：网络

IVPT常用于辅助早期药物筛选、皮肤制剂开发及优化、生物等效性（Bioequivalence, BE）评估及药品或化妆品安全性评估等几方面。

02    IVPT皮肤使用相关指导原则要求

早在2018年，中国国家食品药品监督管理局药品评审中心（Center for Drug Evaluation, CDE）就在《新注册分类皮肤外用仿制药的技术评价要求（征求意见稿）》提出了“体外透皮试验建议参考国内外相关指导原则开展相关研究工作"。在此之后，2025年6月，CDE公布了《局部起效化学仿制药体外释放（IVRT）与体外透皮（IVPT）研究技术指导原则（试行）》的通告，其中关于IVPT部分就皮肤模型、取材、时间、温度及厚度等有了明确的规定。此外，美国食品和药物管理局（Food and Drug Administration，FDA）、欧洲药品管理局（European Medicines Agency，EMA）及日本医药品医疗器械综合机构（Pharmaceuticals and Medical Devices Agency, PMDA）均对IVPT皮肤模型选择等方面有着相同或不同的要求。

🔷 皮肤来源 

CDE：离体人皮肤

FDA：离体人皮肤

EMA：离体人皮肤

PMDA：离体动物皮肤（大鼠、小鼠或猪）

 🔷 皮肤温度 

CDE：32℃±1℃

FDA：32℃±1℃

EMA：32℃±1℃

PMDA：32℃±0.5℃

 🔷 皮肤类型 

CDE：所有供体皮肤应以一致的方式制备，并保持相对一致的厚度。

FDA：建议所有使用的皮肤均来自同一来源

EMA：应选用不同供体的皮肤样本。每次重复实验时，测试配方、参照配方和对照配方需使用同一供体皮肤进行检测，理想情况下应取自相邻部位。

PMDA：腹部或背部等

 🔷 屏障完整性（Skin Barrier Integrity Test）

CDE：每次试验前后应检测皮肤完整性。

FDA：应评估角质层的完整性

EMA：每次实验前应检查皮肤完整性

PMDA：应保证皮肤屏障功能完整性

 🔷 供体数量 

CDE：建议采用多个皮肤供体（如 4~6 个）

FDA：建议采用多个皮肤供体（如 4~6 个）

EMA：皮肤供体数量不应少于12例

PMDA：未明确指示

 🔷 试验时间 

CDE：48小时

FDA：48小时

EMA：不超过24小时

PMDA：不超过24小时

综上所述，我们发现仅日本医药品医疗器械综合机构（Pharmaceuticals and Medical Devices Agency, PMDA）允许使用离体动物皮肤，且范围包含了大鼠、小鼠和猪，其余中国CDE、美国FDA和欧洲EMA三个机构对于IVPT试验的皮肤来源都明确规定为离体人皮肤（Ex Vivo Human Skin），这便对研发测试机构提出了新挑战：

①皮肤供应链管理：需建立合法、符合伦理、稳定的离体人皮来源；确保皮肤质量（如年龄、解剖部位）符合要求。

②试验设计复杂化：人皮来源至少需要来自4~6个不同人供体，每个供体至少4个皮肤样本，皮肤获取难度显著增加，实验周期和难度也显著增加。

③成本断崖式增高：离体人皮来源稀缺、保存条件苛刻，单次实验成本远超动物皮肤或人工膜。

03    IPHASE相关产品

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参考文献：

【1】国家药品监督管理局药品审评中心《局部起效化学仿制药体外释放（IVRT）与体外透皮（IVPT）研究技术指导原则（试行）》。

【2】OECD: "428-Guideline for the Testing of Chemicals-Skin Absorption: in vitro Method." Paris, 2004.

【3】FDA: In Vitro Permeation Test Studies for Topical Drug Products Submitted in ANDAs. October 2022

【4】药明康德公众号：《体外透皮试验（IVPT）在皮肤外用制剂开发中的应用》

【5】局所皮膚適用製剤(半固形製剤及び貼付剤)の処方変更のための生物学的同等性試験ガイドライン（2010 年 11月）