PBMC细胞冻存液使用方法及注意事项

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。目前，细胞冻存的技术是液氮冷冻保存法，利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态，并保持细胞特性。通过冷冻方式保存细胞，可以在需要时进行复苏及继续培养。

最佳的冷冻条件是尽可能地降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤。除了我们知道的 缓慢冷冻，液氮低温保存，快速复苏外，冻存液的选择也非常重要。

1    产品简介

汇智和源无血清细胞冻存液，优化了其配方组分，能够更大程度的减少细胞在冻存、复苏时的损伤。

本品不含血清，降低了DMSO的含量，属于即用型细胞冻存液，无需配制，直接在细胞中加入适量的冻存液即可。对于PBMC细胞、干细胞或T淋巴细胞等细胞具有较好的保护能力，让你轻松拥有高活率的细胞。

2    产品优势

成分：不含血清，降低了DMSO含量

高效：长期冻存后复苏的细胞，仍然可以达到满意的复苏率

方便：即用型，无需额外配制

安全：无微生物污染风险，批次稳定

3    冻存流程

1、冻存管、梯度冻存盒放进4℃冰箱提前预冷；

2、将要进行冻存的PBMC细胞、干细胞或T淋巴细胞等细胞， 350g 离心 7 分钟，弃去上清并收集细胞。

3、加入汇智和源无血清细胞冻存液，吸管轻轻吹打，重悬细胞。计数并调整细胞浓度；

4、将细胞悬液分装于无菌冻存管中，每管加1mL细胞悬液，旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；

5、冻存：细胞放入梯度冻存盒，先在-20℃放1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜，再转入液氮罐。

4    细胞冻存的注意事项

1、缓慢冷冻，细胞逐步脱水，不会因产生大的冰晶而受到损害

2、细胞在-20C冰箱内放置时间不可超过1小时，以防止冰晶过大而破坏细胞。

3、保存在-80°C冰箱中的时间不要超过24h，放入液氮中保存；

4、冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成支原体污染；

5、定期检查液氮储备，保证细胞全部浸在液面下。

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