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进行磁珠分选有哪些操作要求

发布时间:2022-07-11      点击次数:105
  磁珠分选,也被称为免疫磁珠细胞分选,包括使用针对特定细胞表面抗原的抗体标记细胞进行选择或去除。被标记的细胞与磁珠交联,一旦被置于磁场中,即可被吸附。
  免疫磁珠分选有两种方式:有柱式分选和无柱式分选。
  操作磁珠分选有哪些要求
  1 移液枪吸取液体要准确
  2 移液枪的枪头在吸取磁珠或者抗体的时候,枪头要刚好伸进液面以下,不要伸到瓶子底部,以免枪头沾了过多的试剂,再带到了细胞悬液中
  3 磁珠使用前要涡旋混匀
  4 磁极插入细胞悬液5min之后,转移细胞的时候,特别是最后一滴细胞悬液,如果滴不下来,不要晃动磁极,这样会降低细胞和磁极的吸附,进而降低纯度。或者最后一滴细胞可以不要。
  5 细胞和磁珠,以及细胞和抗体的孵育时间,以及分选的步数请遵循protocol,因为protocol是经过优化的方案。
  6重复一次分选可提高收率,对纯度影响不大。每分离一次,收益率通常会增加约8-10%,纯度降低1-2%。
  7 Mojosort Buffer需要提前插入冰中预冷。
  8 磁极下面有一部分没有磁极,注意把流式管往上顶一顶,使得细胞悬液充分在磁极区域。
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