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TK 基因突变试剂盒的原理及优势

发布时间:2021-04-06      点击次数:199
  TK 基因突变试验的原理:
 
  TK 基因突变试验的检测终点是 TK 基因的突变。TK 基因突变属于常染色体基因突变。
 
  TK 基因的产物胸苷激酶在体内催化从脱氧胸苷(TdR)生成胸苷酸(TMP)的反应。在正常情况下,此反应并非生命所必需,原因是体内的 TMP 主要来自于脱氧尿嘧啶核苷酸(dUMP),即由胸苷酸合成酶催化的 dUMP 甲基化反应生成 TMP。但如在细胞培养物中加入胸苷类似物(如三氟胸苷,即 trifluorothymidine,TFT),则 TFT 在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸,进而掺入 DNA,造成致死性突变,故细胞不能存活。若 TK 基因发生突变,导致胸苷激酶缺陷,则 TFT 不能磷酸化,亦不能掺 DNA,故突变细胞在含有 TFT 的培养基中能够生长,即表现出对 TFT 的抗性。根据突变集落形成数可计算突变频率,从而推断受试物的致突变性。在 TK 基因突变试验结果观察中可发现两类明显不同集落,即大/小集落(L5178Y 细胞)或正常生长/缓慢生长集落(TK6 细胞),有研究表明,大集落/正常生长集落主要由点突变或较小范围的缺失等引起,而小集落/缓慢生长集落主要由较大范围的染色体畸变,或由涉及调控细胞增殖的基因缺失引起。
 
  TK 基因突变试剂盒优势:
 
  便捷—— 本试剂盒省去了诱导 S9 制备,阳性底物、筛选培养基的配制和浓度条件摸索的时间,可以直接使用,大大缩短了实验周期。
 
  准确——本试剂盒各成分均经过严格的质量检测,无杂菌污染,诱导 S9 活性均符合 L5178Y 细胞基因突变试验要求,实验结果准确、可靠、重现性高。
 
  稳定—— 本试剂盒稳定性强、易于运输和保存。
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